小鼠脑膜组织提取物培养

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产品描述：
小鼠脑膜组织提取物【Brain: Normal Mouse Meningeal Derivatives】
     小鼠脑膜组织提取物培养脑膜组织由外向内由硬网膜、蛛网膜和软脑膜组成。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠脑膜组织中高质量的总RNA，PCR准备的*条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA*链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及0mg总RNA。68℃反应0min 后终止RT反应。利用x RT Buffer 运输cDNA， μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
技术传授:
冻存培养基
小鼠脑膜组织提取物培养冻存细胞时必须使用的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的*冻存培养基。
）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型*冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含0% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 
.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约00-200×g的离心力将细胞悬液离心5至0分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低  °C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
以下是小鼠脑膜组织提取物培养的相关产品：

兔抗CXorf36多克隆抗体 英文名：Anti-CXorf36 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗CYP46A多克隆抗体 英文名：Anti-CYP46A rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗CYP26多克隆抗体 英文名：Anti-CYP26 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗PTGIS多克隆抗体 英文名：Anti-PTGIS rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗CSTB多克隆抗体 英文名：Anti-CSTB rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗MT-CYB多克隆抗体 英文名：Anti-MT-CYB rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗AAM多克隆抗体 英文名：Anti-AAM rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗AB2IP多克隆抗体 英文名：Anti-AB2IP rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗AP多克隆抗体 英文名：Anti-AP rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗RHOBTB2多克隆抗体 英文名：Anti-RHOBTB2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗AH2多克隆抗体 英文名：Anti-AH2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗X4多克隆抗体 英文名：Anti-X4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

小鼠脑膜组织提取物培养Topotecan hydrochloride 盐酸拓扑替康 943-54-6  20mg

钙荧光探针Fura-2, AM mg  支

Pyruvic acid 丙酮酸 25g  瓶

Urea 尿素 500g  瓶

Arecoline hydrobromide 氢溴槟榔碱 300-08-3  50mg

30ml亲和层析柱 (2.3×0) 30ml  个

中性树胶 (切片标本永保藏封片剂) 00ml  瓶

Pregnenolone 孕甾烯醇酮 45-3-  20mg

Trizol 00ml  瓶

反转录酶 M-MLV 0000u  支

0.5mlPCR管，0盒/箱 000支  盒

细胞可重发跟不可重发：
可以重发的情况有哪些？
（）细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、破损、漏液等，重发；
（2）冻存的细胞复苏后，绝大多数细胞未存活，重发；
（3）存活的细胞静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；
（4）冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封，出现污染，重发；
（5）视具体情况而定。
小鼠脑膜组织提取物培养出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）细胞状态不好，未细胞培养前3天照片的，不重发；
（4）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（5）细胞收到2天内，未告知，不重发；