大鼠视网膜组织提取物培养

大鼠视网膜组织提取物【Eye: Normal Rat Retinal Pigment Derivatives】
  大鼠视网膜组织提取物培养视网膜组织居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠视网膜组织中高质量的总RNA，PCR准备的*条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA*链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及0mg总RNA。68℃反应0min 后终止RT反应。利用x RT Buffer 运输cDNA， μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱

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注意事项：
. 接收到大鼠视网膜组织提取物培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
大鼠视网膜组织提取物培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

兔抗KRTAP-多克隆抗体 英文名：Anti-KRTAP- rabbit polyclonal antiboy级别级HACL; HACL-;

兔抗GPC5多克隆抗体 英文名：Anti-GPC5 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗GPC3多克隆抗体 英文名：Anti-GPC3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗GPC2多克隆抗体 英文名：Anti-GPC2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗TNFSF8多克隆抗体 英文名：Anti-TNFSF8 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗GLI3多克隆抗体 英文名：Anti-GLI3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗GLI多克隆抗体 英文名：Anti-GLI rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗GZMH多克隆抗体 英文名：Anti-GZMH rabbit polyclonal antiboy级别级CCP-X; CGL-2;

兔抗GZMM多克隆抗体 英文名：Anti-GZMM rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

兔抗GRM4多克隆抗体 英文名：Anti-GRM4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

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兔抗GSK3B多克隆抗体 英文名：Anti-GSK3B rabbit polyclonal antiboy 冷冻（-20℃） 避光

大鼠视网膜组织提取物培养标准品　　　英文名称Bicalutamide　　　规格　：200mg　　CAS:90357-06-5　　进口、国产

相关物质A标准品　　　英文名称　　　规格　：25mg　　CAS:　　进口、国产

相关物质B标准品　　　英文名称　　　规格　：0mg　　CAS:　　进口、国产

牛磺胆酸碱标准品　　　英文名称Bile Salts　　　规格　：0mg　　CAS:45-42-6　　进口、国产

越橘提取物标准品　　　英文名称Powdered Bilberry Extract　　　规格　：500mg　　CAS:　　进口、国产

生物活性测定阳性对照标准品　　　英文名称Positive Bioreaction　　　规格　：3 strips　　CAS:　　进口、国产

标准品　　　英文名称Biotin　　　规格　：200mg　　CAS:58-85-5　　进口、国产

比哌立登标准品　　　英文名称Biperiden　　　规格　：200mg　　CAS:54-65-8　　进口、国产

盐酸比哌立登标准品　　　英文名称Biperiden Hydrochloride　　　规格　：200mg　　CAS:235-82-　　进口、国产

标准品　　　英文名称Bisacodyl　　　规格　：25mg　　CAS:603-50-9　　进口、国产

马来酸二乙基己酯标准品　　　英文名称Bis(2-ethylhexyl)maleate　　　规格　：2ml　　CAS:42-6-5　　进口、国产

双去氧基姜黄素标准品　　　英文名称Bisdesmethoxycurcumin　　　规格　：30mg　　CAS:24939-6-0　　进口、国产

枸橼酸铋标准品　　　英文名称Bismuth Citrate　　　规格　：00mg　　CAS:83-93-4　　进口、国产