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小鼠胚胎成纤维细胞;MEF品牌 | 贴壁生长 | 价格 |
细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF品牌
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 取孕9天的65小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂霉C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-2 4.5g/Liter Glucose) 0%CS
传代方法 :3传代;3~4天次。
传代情况 P
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
培养步骤:
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF品牌对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按:2到:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
. 接收到小鼠胚胎成纤维细胞;MEF品牌,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
常春藤苷C CAS 426-03-6 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;5mg/支
3-吲哚 CAS 订购|咨询 规格: 0mg
DL-苹果酸 CAS 订购|咨询 规格: 00mg
反二酸(富马酸) CAS 0-7-8 订购|咨询 规格: 20mg
原人参三醇 CAS 34080-08-5 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg
黄芪皂苷III CAS 84687-42-3 订购|咨询 规格: HPLC≥98%,0mg/支
瓜子金皂苷己 CAS 订购|咨询 规格: 20mg
卫矛醇;Dulcitol CAS 608-66-2 订购|咨询 规格: 20mg
没食子儿茶素没食子酸酯; (-)-Gal CAS 4233-96-9 订购|咨询 规格: 20mg
3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇;3,29 CAS 87300-54-8 订购|咨询 规格: 20mg
杠柳苷 CAS 337-64-9 订购|咨询 规格: 20mg
5(B5);纯品型;标准品 CAS 37-08-6 订购|咨询 规格: 0.g
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF品牌LRRC59 LRRC59蛋白抗体 规格: 0.2ml
WT-/Wilms Tumor Protein 母细胞瘤蛋白抗体 规格: 0.ml
LIFR/CD8 白病抑制因子受体抗体 规格: 0.mlGGCX γ-谷氨酰羧化酶抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗人IgM 规格: 0.mlMouse Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格: 0.ml
CD4 CD4抗体 规格: 0.ml
SLC26A4 钠单独转运蛋白SLC26A4抗体 规格: 0.ml
BAFF/CD257 TNF家族B细胞激活因子抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/APC APC标记的羊抗大鼠IgG 规格: 0.ml
C3orf2/XXYLT 3号染色体开放阅读框2抗体 规格: 0.2ml
Phospho-Dab (Tyr220) 磷酸化Disabled 抗体 规格: 0.ml
PTPIP5/FAM82A2 蛋白磷酸酶相互作用蛋白5抗体 规格: 0.2ml
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