质粒名称:pHyVec4
质粒规格:2ug
实验步骤:
)质粒提取
.0,000min离心收集.5-5ml菌液沉淀于.5ml离心管中
2.加入00溶液,振荡至*悬浮
3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置
3分钟
4.加入50山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,0,00g离心0mins
5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的/氖仿/异成醇混
合均匀0,000离心5min
将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-omin,沉
降DNA
7.0000g离心0分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入ml706的乙醇洗涤沉淀,0,000离
心5分钟
8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇
9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA
2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳
灌胶:胶中加入芡光染料< SYBR Green)
加样:质粒+上样緩冲液→混匀
电泳
结果观察:UV灯下
pHyVec4实验分析:
裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因
用碱裂解法除去杂质
、防止DNA裂解: Solution
)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解
00427-20030 含量测定 50mg
00428-20040 HPLC含量测定 50mg
00429-20040 HPLC含量测定 50mg
00430-20050 含量测定 00mg
0043- 尿蘘素 50mg
00432-20040 枸橼酸喷妥维林 含量测定 50mg
00433-20030 HPLC含量测定 50mg
00434-20030 (尼古酸) 含量测定 50mg
00435-20070 硝基呋喃丙烯酰胺(呋喃丙胺杂质A) 检查用 00mg
00437-20060 甲氧沙 含量测定 00mg
00438-20040 异烟() UV法溶出度检查 00mg
00439-20030 含量测定 50mg
00440-20030 TCL法检查 50mg
0044-20040 溶出度检查 50mg