NCI-H295R (人肾上腺皮质腺癌细胞)

NCI-H295R (人肾上腺皮质腺癌细胞)

商品属性

商品介绍

别称 NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1

种属 人类

年龄（性别） 48岁

组织来源 器官：肾上腺

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

参考资料(来源文献)

生物安全等级 1

生长培养基 DMEM/F12＋ITS-G（PB180429）＋10% FBS＋1% P/S(PB180120）

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

基因表达情况 aldosterone; cortisol; C19 steroids

细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

细胞传代培养操作步骤：

（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。

（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。

（3）加入覆盖瓶底量的且含有EDTA。

（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，加入2倍量的中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。

（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。

（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。

（9）细胞冻存

公司正在出售的产品：

大鼠Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)检测试剂盒 ，英文名： PⅠCP ELISA Kit

People sleep inducing peptide (DSIP) ELISA Kit 人促睡眠肽(DSIP)检测试剂盒

Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 犬血栓前体蛋白(TpP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCICP(Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeIcollagen)ELISAKit人Ⅰ型前胶原C末端肽

细菌活力蓝色荧光(DAPI)检测试剂盒50次

Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit兔子结合蛋白4(RBP-4)检测试剂盒规格：96T/48T

ERBB2重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1 0.5mgHO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原

SIRT1重组人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 Protein

CDCP1 Protein Human 重组人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 标签)

TNFRSF9 Protein Mouse 重组小鼠 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 标签)

HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1 0.5mgHO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原

CDCP1 Protein Human 重组人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 标签)

ERBB2重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

TNFRSF9 Protein Mouse 重组小鼠 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 标签)

SIRT1重组人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 Protein

NCI-H295R (人肾上腺皮质腺癌细胞)小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human lymphocyte function associated aigen 1 (LFA-1/CD11a+CD18) ELISA Kit 人淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)检测试剂盒

Humanglucoseoxidase,GODELISAKit 人葡萄糖氧化酶(GOD)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenImmuneRNA,Irna检测试剂盒鸡免疫核糖核酸(Irna)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞COLLAGENI蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit小鼠热休克因子1(HSF1)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠活化调节趋化因子(mouse TARC)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠抗复合物(mouse TAT)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠组织因子(mouse TF)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠组织因子抑制物(mouse TFPI)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。