RKO-AS45-1 (人结肠癌转基因细胞)

RKO-AS45-1 (人结肠癌转基因细胞)

本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！

商品详情：

别称 RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45

种属 人类

年龄（性别） 不详

组织来源 结肠癌，整合起动GADD45a表达载体的CMV启动子

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述：人的cDNA中编码GADD45的开放阅读框克隆到表达载体pCMV.3中，转染结肠癌细胞RKO，建立了RKO-AS45-1细胞株。RKO-AS45-1细胞含有稳定整合巨细胞病毒(CMV)启动子的表达载体，RKO-AS45-1细胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45对DNA修复、凋亡和药物敏感性研究。

生物安全等级 2 [Cells Contain CMV viral sequences]

生长培养基 MEM＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

基因表达情况 p53+ (underexpressed)

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞培养注意事项 ：

一、 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

二、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

三、用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

四、贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

五、 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

六、 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

七、该细胞仅供科研使用。

八、备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

九、 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

兔子高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒

People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)检测试剂盒

Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬细胞抗体(ai-macrophageAb)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanepidemicparotitis,EP检测试剂盒人流行性腮腺(EP)检测试剂盒规格：96T/48T

组织PKG激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)检测试剂盒规格：96T/48T

FLT3重组小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein

红细胞生成素受体(EPOR)重组蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)

CRABP1重组人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein

CDK5 Protein Human 重组人 CDK5 蛋白 (GST 标签)

IL17A Protein Canine 重组狗 IL17 / IL17A 蛋白

红细胞生成素受体(EPOR)重组蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)

CDK5 Protein Human 重组人 CDK5 蛋白 (GST 标签)

FLT3重组小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein

IL17A Protein Canine 重组狗 IL17 / IL17A 蛋白

CRABP1重组人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein

RKO-AS45-1 (人结肠癌转基因细胞)小鼠K1(VK1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨钙素/骨谷蛋白(OT/BGP)检测试剂盒

HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin4,IL-4检测试剂盒鸡白介素4(IL-4)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠细胞色素氧化酶（CC0）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠(Cyt-C)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装