细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
H-4-II-E [H4-II-E] (大鼠肝细胞瘤)
商品属性
鉴定 | STR鉴定正确 | 种属 | 大鼠 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 分类 | 大鼠细胞系 |
商品介绍
别称 H-4-II-E; H4IIE
种属 大鼠
年龄(性别) 不详
组织来源 肝脏
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
参考资料(来源文献)
H-4-Ⅱ-E细胞可诱导产生芳香烃羟化酶,用于检测环境样品或食物提取物种皮克级的多氯联苯有机化合物。 |
生物安全等级 1
生长培养基 MEM+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,加入2倍量的中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存
细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
公司正在出售的产品:
小鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒
Human varicella zoster virus IgM (VZV-IgM) ELISA Kit 人水痘带状疱疹病毒IgM(VZV-IgM)检测试剂盒
HumanFibrinogen,FbgELISAKit 人血纤蛋白原(Fbg)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAi-ypsin,AT检测试剂盒人抗(AT)检测试剂盒规格:96T/48T
植物氧化应激活性氧(ROS)比色法定量检测试剂盒(羟自由基)20次
humananGSlaminase2Cpolypeptide,TGM2ELISAKit人转酶2C多肽(TGM2)检测试剂盒规格:96T/48T
AIMP1重组小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein
凋亡相关因子(FAS)重组蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)
KCNIP3重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein
IL3 Protein Human 重组人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白
LTBR Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 标签)
2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid 5mg2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2,4-二氯苯氧乙酸偶联血蓝蛋白
IL3 Protein Human 重组人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白
YWHAE重组小鼠 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 标签) Protein
IL3 Protein Rat 重组大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白
NRG1重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) Protein
H-4-II-E [H4-II-E] (大鼠肝细胞瘤)豚鼠钙调素(CAM)检测试剂盒 ,英文名: CAM ELISA Kit
Human dopamine (DA) ELISA Kit 人多巴胺(DA)检测试剂盒
Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBFELISAKit大鼠B因子
细菌铁型亚盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次
rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)检测试剂盒规格:96T/48T
人转化生长因子β2(TGF-β2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TGF-β2 (ansforming Growth Factor β2) ELISA Kit
人血小板生成素(TPO)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit
人血小板反应蛋白1(TSP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit
人血小板反应蛋白2(TSP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TSP-2 (Thrombospondin-2) ELISA Kit
RG2 D74(大鼠胶质瘤细胞) | 9L/lacZ (大鼠胶质肉瘤细胞) | MMQ (大鼠垂体瘤细胞) | UMR-106 (大鼠骨肉瘤细胞) |
RL1 (大鼠肺成纤维样细胞) | RK1 (大鼠肾细胞) | RIN-m5F (大鼠胰岛β细胞瘤细胞) | RBL-1 (大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞) |
IR983F (大鼠骨髓瘤细胞) | INS-1 (大鼠胰岛细胞瘤细胞) | ||