HELF (人胚肺成纤维细胞)

细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

HELF (人胚肺成纤维细胞)

商品属性

商品介绍

细胞形态 成纤维细胞样

生长培养基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

细胞传代培养操作步骤：

（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。

（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。

（3）加入覆盖瓶底量的且含有EDTA。

（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，加入2倍量的中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。

（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。

（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。

（9）细胞冻存

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

公司正在出售的产品：

大鼠C-C趋化因子6(CCL6)检测试剂盒 ，英文名： CCL6 ELISA Kit

Mice testosterone (T) ELISA Kit 小鼠睾酮(T)检测试剂盒

Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit 小鼠髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanichinellaaibodyELISAKit人旋毛虫抗体

通用型小肠结肠耶尔森氏菌(Yersiniaeerocolitica)试剂盒20次

ELISAKitENA-78/CXCL5大鼠上皮中性粒细胞活化肽78

HSPD1重组小鼠 HSPD1 / HSP60 蛋白 Protein

ADM (Adrenomedullin 0.1mgADM (Adrenomedullin)(22-52) 肾上腺髓质素(22-52)

MET重组人 c-MET / HGFR 蛋白 (aa 956-1390, His & GST 标签) Protein

IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白

IL13RA2 Protein Rat 重组大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白

叉头框蛋白O1(FOXO1)重组蛋白 Recombinant Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)

IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白

TNFSF10重组小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 标签) Protein

IL8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白

SIGIRR重组人 SIGIRR / TIR8 蛋白 (Fc 标签) Protein

HELF (人胚肺成纤维细胞)豚鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)检测试剂盒 ，英文名： ECP ELISA Kit

Residual human bovine serum albumin detection 人的牛血清白蛋白残留检测

MonkeyIerleukin-8,IL-8ELISAKit白介素8(IL-8/CXCL8)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBLC-1/CXCL13(HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1)ELISAKit人B-淋巴细胞趋化因子

细菌离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒20次

RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAKit兔子巨噬细胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)检测试剂盒规格：96T/48T

神经营养素 3(-3)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

神经营养素 4(-4)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

I 型胶原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

 (NO)   作用：   ELISA   规格：      进口分装